神经坏死病毒( nervous necrosis virus,NNV) 是一种世界范围内流行、严重危害多种海水和淡水鱼类的传染性病原。本研究从山东省烟台市某养殖场采集到患病珍珠龙胆石斑鱼幼鱼,通过组织病理检查、TEM观察、RT-PCR检测、细胞分离培养、全基因组扩增、系统发育分析等,分离获得一株病毒,并对其进行鉴定。结果显示,患病石斑鱼视网膜及脑组织中存在大量空泡化病变。TEM观察发现,患病幼鱼视网膜和浓缩的病毒液中均存在大量直径25 nm左右,呈二十面体的病毒粒子。RT-PCR结果显示,仅使用针对NNV的特异性引物可扩增出大小约255bp的特异性条带,经BLAST比对分析,扩增产物与 GenBank 中公布的多株NNV RNA2基因有极高相似性。接种组织匀浆液后,SSN-1和GB细胞出现了典型的细胞病变效应(CPE)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱显示,该病毒有明显的2条蛋白带。克隆获得其RNA1与RNA2序列,基于RNA2的系统进化树结果表明,该毒株与15株已报道的NNV聚为一支,均属于石斑鱼神经坏死病毒型(RGNNV)。综合实验结果可以确认该病毒为一株基因型为RGNNV型的神经坏死病毒,并将其命名为CNPgg2018株。
成果于2020年7月6日发表在领域著名刊物Aquaculture上(doi:10.1016/j.aquaculture.2020.735663,IF=4.242)。该项研究的第一完成人为邢婧教授,通讯作者为战文斌教授。该研究得到国家重点研发计划(2019YFD0900101,2019YFD0900102,2018YFD0900503)、国家自然科学基金(31730101,31672684,1672685)等项目的联合支持。